董清蓮 (黑龍江省饒河縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 155700)
狐貍傳染性肝炎也叫狐貍腦炎,在世界各地區(qū)廣泛流行。犬和狐貍易感,尤其幼齡狐貍最易感。此病除感染狐貍外,也感染犬等毛皮動(dòng)物。幼狐的發(fā)病率高,成狐較低,多半呈地方流行。該病的病原為腺病毒科哺乳動(dòng)物腺病毒屬,臨床上的主要特征為體溫升高,腹瀉與便秘交替,后肢麻痹和神經(jīng)癥狀。
1 流行病學(xué)
本病感染所有的毛皮動(dòng)物,幼狐和幼犬最易感,死亡率高達(dá)40%~50%,成年狐發(fā)病率2%~3%,發(fā)病初期死亡率高,中后期死亡率低。發(fā)病和帶毒的狐為傳染源,康復(fù)和隱性感染狐為最危險(xiǎn)者。病狐通過分泌物和排泄物,污染飼料、飲水、用具及周圍環(huán)境等途徑,傳播此病,感染健康狐。狐貍體外寄生蟲也能成為本病的傳染媒介。該病無明顯的季節(jié)性,但在夏、秋兩季多發(fā)。如果飼養(yǎng)密集也是發(fā)生此病的重要而不可忽視的條件。
2 臨床癥狀
本病自然感染的潛伏期10~20天以上。人工感染的潛伏期為5~6天。在臨床上該病分為3種類型。①急性型。初期精神發(fā)呆,食欲不振或廢絕。體溫高達(dá)41.5℃以上,口渴,嘔吐,病程3~4天,最后昏迷而死。②亞急性型。精神沉郁,體溫出現(xiàn)弛張熱,可視黏膜貧血蒼白或黃染。一側(cè)或兩側(cè)眼發(fā)生角膜炎。喜臥,站立不穩(wěn),走路搖擺,后肢虛弱無力,甚至麻痹。因發(fā)燒心跳加快,每分鐘達(dá)100~120次,脈搏軟弱無力。病狐出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,興奮與沉郁交替。個(gè)別狐肌肉痙攣,興奮沉郁,病程長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月,最終死亡或轉(zhuǎn)為慢性。③慢性型。病狐癥狀不明顯,時(shí)常不愛吃食或無食欲。有時(shí)出現(xiàn)胃腸障礙,腹瀉和便秘交替,漸進(jìn)性的消瘦。體溫升高是短暫的,如飼養(yǎng)管理不好,會(huì)引起死亡。
3 病理學(xué)診斷
病理剖檢變化。急性病例內(nèi)臟器官出血,可見胸腔和腹腔的漿膜和胃腸道黏膜出血,偶爾見骨骼肌和膈肌出血點(diǎn)。肝腫大、充血,呈淡紅色或淡黃色,切面有粘稠的液體流出。大腦血管充盈。亞急性病例可視黏膜蒼白或黃染,骨骼肌為淡紅色至淡黃色,在胸前、鼠蹊部和腹部皮下結(jié)締組織膠樣浸潤(rùn)和出血。胸腔有少許淡玫瑰色或淡黃色的滲出液。肝為櫻桃紅色,切面流出血液。腎腫大,被膜下有出血點(diǎn),切面界線不清。胃腸黏膜潮紅、腫脹,為條索狀出血。胃內(nèi)有煤焦油樣液體,黏膜上有大小不等的潰瘍?cè)睢Dc黏膜肥厚,附有粘液。甲狀腺腫大2~3倍,出血,周圍膠樣水腫。心臟為漿液性心包炎,肺有散在性氣腫區(qū)。慢性病例消瘦和貧血,在腸黏膜皮下組織有新鮮或陳舊的出血點(diǎn)。脂肪營(yíng)養(yǎng)不良,肝腫大質(zhì)硬,呈豆蔻狀。
病理組織學(xué)變化。其特征為血管損壞,(www.nczfj.com)肝呈退行性變化及少量炎性變化。網(wǎng)狀-組織細(xì)胞系統(tǒng)普遍激活,形成核內(nèi)包涵體,細(xì)胞壞死。
4 病原學(xué)診斷
①細(xì)胞培養(yǎng)。首先采取病死狐的肝、腦、腎、脾等病料研碎,制成懸液,離心,取上清液接種犬或豬的原代細(xì)胞,進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)。根據(jù)本病毒特征性的致細(xì)胞病變,如出現(xiàn)單個(gè)的圓形折光細(xì)胞,并在細(xì)胞單層內(nèi)出現(xiàn)空泡,小島樣病變細(xì)胞堆積成較大團(tuán)塊,如葡葡樣。同時(shí),在細(xì)胞核內(nèi)見有核內(nèi)包涵體方可確診。②皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)。采取病死狐的臟器研碎,制成懸液,離心后取上清液,加入“甲醛”(福爾馬林溶液)滅活,然后給狐貍皮內(nèi)接種,如出現(xiàn)紅腫可判為陽性,無紅腫可判為陰性。③電子顯微鏡檢查。采取病料研碎,制成懸液,離心,取上清液再離心,棄上清液,在沉淀中加數(shù)滴蒸餾水,以吸管吹吸使沉淀分散懸浮,取一滴加于銅網(wǎng)上進(jìn)行負(fù)染。在電子顯微鏡下可見大小為70~90微米的病毒粒子。
5 血清學(xué)診斷
血清中和試驗(yàn)中的固定病毒稀釋血清的方法是將事先已滴定的病毒原液稀釋成200 TCID50(或LD50、EID50)與等量血清混合后,每個(gè)劑量接種量含有100 TCID50。血清先用5倍稀釋,放于56℃滅活30分鐘,用Hank氏液作倍比稀釋。取病毒液與不同稀釋度的血清等量混合,在37℃水浴中作用1~2小時(shí),每一稀釋度接種3~6瓶細(xì)胞培養(yǎng)物,觀察細(xì)胞病變。另外,應(yīng)設(shè)不加血清的病毒液對(duì)照,高濃度血清對(duì)細(xì)胞的毒性對(duì)照,空白對(duì)照,陰性、陽性血清對(duì)照。結(jié)果判定為如果培養(yǎng)的細(xì)胞無病變,說明被檢病狐血清中有病毒性傳染性肝炎抗體,為陽性。如培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)病毒,則不是本病,為陰性。在試驗(yàn)對(duì)照正確的條件下,計(jì)算細(xì)胞的半數(shù)保護(hù)量(PD50),即為中和價(jià)。