佟桂芝，宋　斌，董正德

（黑龍江省畜牧研究所，黑龍江齊齊哈爾161005）

作者簡(jiǎn)介：佟桂芝（1967　-），女，碩士，研究員，從事反芻動(dòng)物的飼養(yǎng)與繁殖工作。

1　同期發(fā)情與人工授精

人工授精技術(shù)自20世紀(jì)40年代問世以來，經(jīng)過幾十年的不斷發(fā)展和完善，特別是精液冷凍保存技術(shù)的成熟，使人工授精技術(shù)成為肉羊育種中最重要的生物技術(shù)。該技術(shù)可以使先進(jìn)的種公羊得到更好的利用，精液冷凍保存技術(shù)使得先進(jìn)種公羊的使用范圍不再受時(shí)間和地區(qū)的限制。這就擴(kuò)大了先進(jìn)種公羊在肉羊遺傳改良中的作用。精液冷凍保存技術(shù)還減少了種公羊的飼養(yǎng)量，提高了公羊的選擇強(qiáng)度，加快了群體的遺傳進(jìn)展，更可靠地實(shí)現(xiàn)肉羊品種資源保護(hù)。

使母羊在同一時(shí)期內(nèi)發(fā)情并排卵的技術(shù)，稱為同期發(fā)情。同期發(fā)情實(shí)質(zhì)是誘導(dǎo)母羊在同一時(shí)期發(fā)情排卵的方法。定時(shí)輸精，是在近年發(fā)展起來的一種能使多只母羊在短時(shí)間內(nèi)集中發(fā)情和集中進(jìn)行人工授精的技術(shù)。采取同期發(fā)情技術(shù)，減少空懷時(shí)間，確保良種母羊1年2產(chǎn)，既節(jié)省飼料成本，又增加產(chǎn)羔收入，便于人工授精技術(shù)的推廣和普及，提高冷凍精液配種工作效率；因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單和成本低，同期發(fā)情和人工輸精是使用最廣泛的輔助生殖技術(shù)。

2.　超數(shù)排卵與胚胎移植技術(shù)(MOET)

超數(shù)排卵即應(yīng)用外源性促性腺激素誘發(fā)母羊卵巢發(fā)育并排出具有受精能力的卵子的方法，稱為超數(shù)排卵，簡(jiǎn)稱“超排”。超數(shù)排卵是進(jìn)行胚胎移植時(shí)，對(duì)供體母羊必須進(jìn)行的程序，目的在于得到更多的胚胎。胚胎移植是對(duì)超數(shù)排卵處理的母羊（供體），從其輸卵管或子宮內(nèi)取出許多胚胎移植到另一群母羊（受體）的輸卵管或子宮內(nèi)，以達(dá)到產(chǎn)生供體后代的目的。主要包括下列環(huán)節(jié)：①選擇生殖機(jī)能正常、具有優(yōu)良遺傳特性的母羊作為供體，在發(fā)情周期的中后期，注射促性腺激素，激發(fā)卵巢使之超數(shù)排卵。然后采用手術(shù)方法或腹腔鏡法采集胚胎，用生理培養(yǎng)液將胚胎由子宮角沖出。②對(duì)采集的胚胎進(jìn)行鑒定，選出正常者用于移植。也可以進(jìn)行培養(yǎng)，或在零下196℃的液態(tài)氮中長(zhǎng)期保存，待需要時(shí)再行移植。③在受體發(fā)情后的相應(yīng)時(shí)間，按上述采集胚胎的相同途徑，利用移植管將胚胎移植到受體子宮或者輸卵管的一定部位內(nèi)。為此，在供體發(fā)情時(shí)須選擇同時(shí)自然發(fā)情的母畜留作受體，或在對(duì)供體進(jìn)行激素處理誘發(fā)超數(shù)排卵的同時(shí)，選擇若干適用的受體也注射激素，使之與供體同時(shí)發(fā)情，但不配種，留待移植之用。如使用冷凍保存的胚胎，應(yīng)先選出受體母畜，待其自然發(fā)情后再根據(jù)胚胎的發(fā)育日齡進(jìn)行移植。通過MOET技術(shù)可以使先進(jìn)的肉羊母羊能獲得更多的后代[養(yǎng)殖網(wǎng):www.nczfJ.com/]。

3　幼畜超排、活體采卵、體外受精

幼畜超排是根據(jù)性成熟前幼畜（1～2月齡）卵巢對(duì)生殖激素敏感，卵泡發(fā)育很少發(fā)生閉鎖的特殊生理特點(diǎn)而發(fā)明的一項(xiàng)高效率生產(chǎn)卵母細(xì)胞的新技術(shù)。誘導(dǎo)幼畜超數(shù)排卵技術(shù)可以充分挖掘和利用優(yōu)良母畜的早期繁殖潛力，大大加快家畜育種及品種改良進(jìn)程，同時(shí)也將解決種畜胚胎移植商業(yè)化所需胚胎來源匱乏及胚胎生產(chǎn)成本昂貴的問題，將大大促進(jìn)胚胎生產(chǎn)的商業(yè)化應(yīng)用，前景十分廣闊。但是，這種幼畜超排的卵，在體外受精后，發(fā)育到囊胚期的潛能比成年動(dòng)物超排的卵發(fā)育潛能有所降低。

肉羊卵母細(xì)胞的活體采集技術(shù)(簡(jiǎn)稱活體采卵，ovum-pick-　up，OPU)是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一項(xiàng)新型獲得先進(jìn)種母羊卵母細(xì)胞技術(shù)．是繼羊體外受精、胚胎移植技術(shù)之后研究并推出的一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)。該技術(shù)與體外胚胎生產(chǎn)(IVP)技術(shù)相結(jié)合，可以反復(fù)地從性成熟前母羊體內(nèi)采集卵母細(xì)胞，結(jié)合體外受精(IVF)技術(shù)生產(chǎn)大量系譜明確的胚胎，使其繁殖后代，克服了超數(shù)排卵和屠宰取卵技術(shù)應(yīng)用中需要等待母羊成熟的缺點(diǎn)，從而大大縮短了世代間隔，加快了育種進(jìn)程。這種技術(shù)始于20世紀(jì)80年代初期，至90年代中期實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)性應(yīng)用，目前在一些發(fā)達(dá)國(guó)家，如日本、加拿大、美國(guó)、荷蘭均實(shí)現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。采用活體采卵(LOPU)一卵母細(xì)胞體外受精(IVF)　-胚胎移植(ET)配套技術(shù)。活體采卵的方法主要有手術(shù)法和窺鏡法2種。

體外受精技術(shù)也稱胚胎的體外生產(chǎn)技術(shù)(IVP)。包括以下幾個(gè)步驟：卵母細(xì)胞采集、卵母細(xì)胞的體外成熟、精液預(yù)處理、體外受精、胚胎體外培養(yǎng)、和胚胎移植。迄今為止體外受精在各個(gè)主要技術(shù)環(huán)節(jié)上的效率還不高，因此總體技術(shù)水平尚未達(dá)到應(yīng)用水平的要求。

4　性別控制

為了達(dá)到人為控制肉羊群性比例，人為對(duì)胚胎性別鑒定進(jìn)行了技術(shù)研究。對(duì)肉羊進(jìn)行性別控制的實(shí)用技術(shù)目前有兩種，一種是利用性控精液通過人工授精生產(chǎn)體內(nèi)胚胎或通過體外受精生產(chǎn)體外胚胎；另一種是通過控制母羊的生殖道環(huán)境來控制胚胎的性別。而早期對(duì)胚胎進(jìn)行性鑒別方法有兩種，即通過PCR法或LAMP法對(duì)體內(nèi)外生產(chǎn)胚胎進(jìn)行性鑒別。然后根據(jù)需要選擇移植方案，生產(chǎn)已知性別胚胎。

在肉羊良種擴(kuò)繁方面，人工授精、胚胎移植等生物技術(shù)仍然發(fā)揮著重要作用；同期發(fā)情及定時(shí)輸精技術(shù)在規(guī)?；庋驁?chǎng)的應(yīng)用加快了純種擴(kuò)繁的步伐；一胎雙羔研究，羔羊超排、羔羊的性別控制給肉羊的純種擴(kuò)繁提供的無數(shù)的可能，希望在不遠(yuǎn)的將來，該項(xiàng)技術(shù)達(dá)到應(yīng)用推廣階段。