趙宏偉 李曉福（遼寧省昌圖縣八面城動物衛(wèi)生監(jiān)督所 112512）

兔鏈球菌病是一種由溶血性鏈球菌引起的以仔兔急性敗血癥或下痢為特征的傳染病。兔鏈球菌病主要是一種直徑0.5~l.0微米的球菌，呈鏈狀排列，鏈的長短因活體或體外培養(yǎng)而有不同。培養(yǎng)時，對營養(yǎng)要求較高，普通培養(yǎng)基上生長不良，需在培養(yǎng)基中加入血清、血漿、腹水、葡萄糖等才能良好生長。

1 流行病學(xué)

本病一年四季均可發(fā)生，帶菌動物及病兔是主要傳染源。病原菌隨分泌物和排泄物污染飼料、飲水、空氣、籠具等經(jīng)健康兔上呼吸道黏膜或扁桃體而感染。當(dāng)飼養(yǎng)管理不當(dāng)、受涼感冒、長途運(yùn)輸?shù)纫蛩貙?dǎo)致兔機(jī)體抵抗力降低時，可誘發(fā)本病。天氣變化也是誘發(fā)本病的重要因素。春、秋兩季較為多見，主要危害幼兔。

2 臨床癥狀

發(fā)病兔表現(xiàn)為食欲減退，精神沉郁，體溫升高，呼吸困難，有漿液性鼻汁，有時腹瀉，有的病例不顯臨床癥狀而急性死亡。

3 病理學(xué)診斷

皮下組織呈出血性漿液性浸潤，脾臟腫脹，出血性腸炎，肝臟和腎臟脂肪變性。肺臟暗紅或灰白色，伴有胸膜肺炎、心內(nèi)膜炎。

4 病原學(xué)診斷

病料采集。有病變的組織、化膿灶、鼻咽內(nèi)容物、腸道內(nèi)容物等作為被檢材料。

顯微鏡鏡檢。取病兔血液、肝、脾等組織涂片，（www.nczfj.com）進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，若發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性的球菌，呈鏈條狀排列，可做出初步診斷。

細(xì)菌分離培養(yǎng)。取病變組織或炎性滲出物以劃線法接種血液平板，37℃培養(yǎng)24小時，觀察菌落形態(tài)及溶血情況。鏈球菌在血液瓊脂培養(yǎng)基上發(fā)育良好，37℃培養(yǎng)一天，形成露滴樣、圓形、凸起、灰白色菌落，β溶血，培養(yǎng)時間延長，則菌落呈扁平狀。在0.1%美藍(lán)牛乳，6.5%氯化鈉肉湯，pH值9.6肉湯，40%膽汁瓊脂等培養(yǎng)基上不發(fā)育。不分解馬尿酸鈉，淀粉。水解精氨酸產(chǎn)生氨氣。不發(fā)酵菊糖和海藻糖。分解蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

細(xì)菌鑒定。莢膜染色（印度墨汁法）：取一接種環(huán)培養(yǎng)物于載玻片一端，另取一接種環(huán)2%福爾馬林印度墨汁，與菌液混合，推成薄片，自然干燥，火焰固定，再滴加革蘭氏染色液中的石炭酸復(fù)紅染色液，染色30秒，吸去多余液體，待干燥后，油鏡觀察。背景呈黑色，菌體染成紅色，其周圍有一較寬的無色透明環(huán)，即莢膜染色陽性反應(yīng)。溶血性試驗：通常采用平板法。將細(xì)菌接種在血液瓊脂平板上，觀察溶血環(huán)的產(chǎn)生、顏色、大小等。鏈球菌為β溶血。鏈激酶試驗：首先配制草酸鉀人血漿。草酸鉀0.01克放入滅菌小試管中，再加入5毫升人血，混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液即為草酸鉀人血漿。試驗方法為吸取草酸鉀血漿0.2毫升，加0.8毫升滅菌生理鹽水，混勻，再加入37℃培養(yǎng)24小時的細(xì)菌培養(yǎng)基0.5毫升及0.25%氯化鈣0.25毫升，振蕩搖勻，置于37℃水浴10分鐘，血漿混合物自行凝固，然后觀察凝塊重新溶解的時間，完全溶解為陽性，如24小時后不溶解即為陰性。血清學(xué)分群試驗：將分離的細(xì)菌用熱酸等提取法提取群特性（C）抗原，再與特異性抗血清作沉淀反應(yīng)，在界面處有白色沉淀物者，表示為陽性結(jié)果。

動物接種試驗可以采用小鼠或豚鼠進(jìn)行，但小鼠最敏感。將病料作成懸浮液或用培養(yǎng)物進(jìn)行皮下、靜脈或腹腔接種，接種動物常于18~72小時呈敗血癥死亡，然后回收細(xì)菌培養(yǎng)，其實質(zhì)臟器有大量細(xì)菌生長。對于小鼠試驗，皮下或腹腔注射被檢菌株的血清肉湯培養(yǎng)物0.2毫升，一般接種鼠于24~72小時死亡。死亡鼠脾臟腫大，有小出血點(diǎn)。肝臟腫大，有粟粒大散在性壞死灶。腎腫大，有出血點(diǎn)和淤血斑，間有小化膿灶。腸道黏膜充血、出血。淋巴結(jié)腫大、出血。肺卡他性炎癥，氣管黏膜有出血點(diǎn)。心外膜有出血點(diǎn)。對于豚鼠試驗，用上述培養(yǎng)物0.5毫升皮下或腹腔注射，一般于48~72小時死亡，病變與小鼠相似。

5 血清學(xué)診斷

免疫擴(kuò)散試驗。取瓊脂糖1克，加入Tris緩沖液（pH值8.6）100毫升，0.1%甲基橙10毫升，煮沸后加入0.01%硫柳汞，制成2~3毫米厚平板。按六角形模型打孔，孔距為4毫米。周圍孔徑為4毫米，加陽性血清和被檢血清；中間孔徑為5毫米，加抗原。置室溫24~48小時判定結(jié)果。凡抗原孔與被檢血清孔之間形成一條致密沉淀線及其末端向毗鄰的被檢血清孔之抗原孔方向偏彎者均判為陽性。