2002年5月，山東省萊州市朱由鎮(zhèn)一獺兔飼養(yǎng)戶，引進(jìn)160只3月齡獺兔，發(fā)生以排膠凍樣和水樣糞便、腹部發(fā)黑、結(jié)膜蒼白、消瘦和痙攣死亡為特征的疾病，我們根據(jù)觀場調(diào)查、臨床診斷、剖解、實(shí)驗(yàn)室診斷，確診為大腸桿菌與球蟲混合感染，情況如下：

1 現(xiàn)場調(diào)查

該兔場由于引種前準(zhǔn)備不充分，兔飼養(yǎng)在三層水泥制的老兔舍，由于底板縫隙小，而且縫隙僅中央部分有，大部分兔糞便都堆積在兔窩角落，每窩飼養(yǎng)2～3只，兔體被毛污濁，地面潮濕，兔舍窗小，通風(fēng)不好，整個(gè)兔舍糞尿味刺鼻。據(jù)畜主講，剛引進(jìn)來10天內(nèi)，兔群并無異常，正準(zhǔn)備遷到新建兔舍時(shí)有20只兔死亡，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)用了一些藥物，但病情繼續(xù)發(fā)展。

2 臨床癥狀

病兔體溫正?；虻陀谡ｓw溫，精神沉郁，被毛粗亂，脫水，消瘦，貧血，腹部膨脹，劇烈腹瀉，肛門和后肢的被毛附著大量明膠樣和兩頭尖的糞污。病兔四肢發(fā)冷，經(jīng)常磨牙，流涎。病程長短不一，有的無癥狀很快死亡；有的突然側(cè)身倒地，肌肉痙攣，頭后仰，發(fā)出慘叫，迅速死亡；病程稍長的脫水、消瘦、貧血，最后衰竭死亡。

3 剖檢病變

對病死的13只兔進(jìn)行了剖檢，發(fā)現(xiàn)大部分腸黏膜發(fā)炎，有的有出血點(diǎn)或淡黃色的結(jié)節(jié)。胃膨脹，胃黏膜發(fā)炎，充滿多量液體和氣體；十二指腸充滿染有膽汁的黏液樣的液體；空腸擴(kuò)張，內(nèi)有半透明膠水樣液體；回腸內(nèi)容物呈現(xiàn)黏膠樣，糞球細(xì)長，兩頭尖，外面包有黏稠液或灰白色膠凍樣分泌物；結(jié)腸擴(kuò)張，有透明膠樣黏液；直腸有大量的膠凍樣液體，黏膜與漿膜充血，有出血斑點(diǎn)；大部分病例盲腸尤其是蚓突有大量淡黃色的結(jié)節(jié)。部分病例膽囊脹大，肝臟、心臟有小點(diǎn)壞死灶。膀胱積有黃色混濁尿液，膀胱黏膜脫落。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 涂片鏡檢

用病死兔肝臟、心血、結(jié)腸內(nèi)容物，分別涂片，革蘭氏染色，鏡檢，發(fā)現(xiàn)有單個(gè)或呈短鏈狀排列、兩端鈍圓的短桿菌，無莢膜和芽孢，有鞭毛，有運(yùn)動(dòng)性，革蘭氏陰性。

剪開盲腸，在結(jié)節(jié)性病灶處刮取少量腸黏膜，置于載玻片上，滴加1滴甘油飽和鹽水，調(diào)和均勻，加上蓋玻片，進(jìn)行鏡檢，發(fā)現(xiàn)有許多艾美球蟲卵囊存在。

4.2 分離培養(yǎng)

無菌粘取或鉤取新鮮病死兔的肝臟、心血、結(jié)腸內(nèi)容物，用劃線法接種于普通瓊脂平板培養(yǎng)基上，37℃恒溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)，挑選單個(gè)圓形、微隆起、濕潤半透明的灰白色的小菌落進(jìn)行純培養(yǎng)(www.nczfJ.com/)。將挑選的菌落分別接種到普通瓊脂培養(yǎng)基和肉湯培養(yǎng)基上，37℃恒溫箱中再培養(yǎng)24小時(shí)，得到純培養(yǎng)物。普通瓊脂培養(yǎng)基上長出圓形、微隆起、濕潤半透明的灰白色的菌落；肉湯培養(yǎng)基生長豐盛，肉湯變得異?；鞚岵⑿纬傻疑恋?。將得到的純培養(yǎng)物抹片、革蘭氏染色、鏡檢，其細(xì)菌的形態(tài)大小與鏡檢結(jié)果相同。

生化試驗(yàn)：用得到的細(xì)菌純培養(yǎng)物做生化試驗(yàn)，結(jié)果是能產(chǎn)生靛基質(zhì)，不分解尿素，不產(chǎn)生硫化氫，不液化明膠，M.R.試驗(yàn)陽性，V-P陰性。能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇，并能產(chǎn)酸、產(chǎn)氣。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：選健康無病的實(shí)驗(yàn)用小豚鼠12只，分甲、乙兩組，甲組為實(shí)驗(yàn)組，乙組為對照組。甲組用培養(yǎng)24 小時(shí)的肉湯培養(yǎng)物0.3mL/只腹腔注射；對照組用無菌生理鹽水0.3mL/只腹腔注射，然后進(jìn)行觀察。兩天后實(shí)驗(yàn)組開始有發(fā)病表現(xiàn)，第3天死亡4只，最后一只第5天死亡。對照組無發(fā)病。取病死小豚鼠的肝臟、心血、腹水分別涂片，革蘭氏染色后鏡檢，鏡檢結(jié)果與上述檢驗(yàn)相同。

根據(jù)以上各種檢驗(yàn)結(jié)果，可確定獺兔已被大腸桿菌感染。由于當(dāng)時(shí)條件有限，不能鑒定大腸桿菌的血清型。

4.3 糞便球蟲卵囊的檢查

涂片鏡檢：在載玻片上先滴1滴50%的甘油水溶液，放入火柴頭大小的新鮮病兔糞便，用竹簽加以涂抹，去掉硬固物，蓋上蓋玻片，顯微鏡下鏡檢。共做抹片5張，其中3張視野中有多個(gè)艾美耳球蟲卵囊存在。為確診用漂浮法檢查。

糞便漂浮法蟲卵檢驗(yàn)：取多個(gè)病兔的新鮮糞便共2Og，放在玻璃杯中，用玻璃棒將兔糞搗爛，加入100mL飽和生理鹽水，再將此糞液用雙層紗布過濾到另一個(gè)燒杯中，濾液靜置30分鐘左右，如果有球蟲卵囊就會(huì)浮到液面上來。用 1Omm 左右的小鐵絲圈，平著接觸液面，沾取一層水膜，抖在載玻片上，蓋上蓋玻片，顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)有大量的艾美耳球蟲卵囊存在。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，獺兔感染了大腸桿菌，同時(shí)也被艾美球蟲所感染。