(黑龍江省獸醫(yī)科學(xué)研究所,黑龍江齊齊哈爾1610 05)
長期以來,對畜禽球蟲病的治療主要依賴化學(xué)合成類藥物或抗生素類藥物,但球蟲極易產(chǎn)生耐藥性,加大劑量使用,不僅增加治療成本,而且易造成藥物殘留,給人類和環(huán)境帶來威脅。中草藥是我國的瑰寶,其治療和調(diào)節(jié)作用是宏觀的,既能消除病癥,又可增強(qiáng)機(jī)體免疫力達(dá)到標(biāo)本兼治的目的,其成本低、殘留少、毒副作用小、不易產(chǎn)生耐藥性,符合食品安全的需要。中草藥成分復(fù)雜,包含有效成分和無效成分,如青蒿素、常山堿、白頭翁皂苷等具有抗球蟲活性,需提取以增藥效。傳統(tǒng)的浸漬法和滲漉法溶劑用量大,用時長,提取率低;回流法、煎煮法、索氏提取法等需要加熱,對熱敏感有效成分不適用,耗時耗能。因此,為保證中草藥有效成分的生理活性、快速、高效、保質(zhì)、保量地提取,需要新型提取工藝,以下將綜述幾種新型、可行的中草藥提取方法。
1適用于實(shí)驗(yàn)室的提取方法
超聲法即超聲波的空化效應(yīng)、機(jī)械振動、攪拌、乳化和擴(kuò)散作用使細(xì)胞破裂,有效成分釋放、溶解的方法。該法提取率高、用時短、溫度低、適應(yīng)范圍廣、雜質(zhì)少、有效成分易于分離與純化、成本低、操作簡便。但噪音大、有效成分易變性、易損失、產(chǎn)業(yè)化困難。徐春龍?zhí)接懥颂崛∫簼舛扰c超聲時間、功率的關(guān)系,并通過銀杏葉中黃酮和甘草中甘草酸的提取試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
微波法即微波能量在細(xì)胞內(nèi)積累的多,而細(xì)胞外的非極性溶劑吸收的少,內(nèi)外能量差導(dǎo)致細(xì)胞破裂,加速有效成分釋放的方法。該法用時短、溶劑用量少、溶劑回收率高、提取率高、產(chǎn)品質(zhì)量好、成本低。但設(shè)備簡陋、輻射不均勻,有效成分易變性、易損失,對溶劑具有選擇性。聶金媛用微波法、超聲法、回流法進(jìn)行茯苓水溶性多糖提取,微波法用時最短,提取率較高。
超臨界流體萃取法即CO2在壓力和溫度控制下的溶解力有選擇地把不同極性、沸點(diǎn)和分子量的成分萃取出來,再減壓、升溫變?yōu)槠胀怏w,使有效成分析出的方法。該法可在常溫下操作,無有機(jī)溶劑殘留.提取物純度高,節(jié)能簡便。適用于低分子、親脂性、低沸點(diǎn)有效成分的萃取,而萃取極性大、分子量高的物質(zhì)需加夾帶劑,設(shè)備成本高,限制該技術(shù)的普及和產(chǎn)業(yè)化。胡淼應(yīng)用超臨界C02萃取法提取青蒿素,并經(jīng)過柱層析和結(jié)晶,使青蒿素含量從原料的0. 6%達(dá)到99%左右。
破碎法即應(yīng)用閃氏提取器的高速機(jī)械剪切力和攪拌力使細(xì)胞破裂,有效成分溶于溶劑的方法。該法用時短,溶劑用量少,效率高、常溫操作避免有效成分破壞,操作簡便,節(jié)能安全。但由于儀器大小限制,提取量有限,應(yīng)用范圍窄,組織破碎后難過濾。曲帥利用回流法、超聲法、閃氏提取法提取人參皂苷,三種方法提取率差異不大,但時間差別顯著,分別需要6h、30min、6min。
2適用于工業(yè)生產(chǎn)的提取方法
超高壓法即常溫下加壓、卸壓過程中使有效成分滲透擴(kuò)散到細(xì)胞外溶劑中的方法。由于不影響共價鍵而適用于小分子物質(zhì)皂苷、黃酮、揮發(fā)油、生物堿、單糖、色素、維生素等的提取。該法用時短、提取率高、雜質(zhì)少、有效成分活性高、能耗低、設(shè)備安全、操作簡單。但設(shè)備昂貴、不同成分的提取壓強(qiáng)不同,尚需探索。陳瑞戰(zhàn)應(yīng)用超高壓法、回流法、超聲法、微波法和超臨界萃取法進(jìn)行人參皂苷的提?。C明超高壓法的優(yōu)勢。
酶解法即根據(jù)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu),有針對性地選擇合適的酶予以分解去除,使有效成分釋放、溶解于溶劑的方法。該法反應(yīng)條件溫和,提取率高,產(chǎn)物不易變性,可優(yōu)化有效成分,成本低,節(jié)能環(huán)保,簡單易行。但對條件要求較嚴(yán)格,需嚴(yán)格控制雜菌,用時長,酶解后有效成分與酶難分離。湯海鷗研究表明黑曲霉AN02鮮曲提取法比復(fù)合酶提取法更能顯著提高有效成分的釋放和提取。
發(fā)酵法即利用益生菌的多種酶,分解細(xì)胞最終得到含有中草藥活性成分、菌體及其代謝物全組分制劑的方法。益生菌將有效成分由大分子轉(zhuǎn)化成容易吸收的小分子,可增強(qiáng)藥效,降低毒副作用,一次發(fā)酵可獲得多種活性物質(zhì),適用范圍廣。但發(fā)酵后氣味難除、微生物難分離、易形成孢子,有二次污染的危險(xiǎn),設(shè)備投資大。李翠朵研究表明發(fā)酵法提取藤茶活性成分的抗氧化能力強(qiáng)于直接提取法。
半仿生法即將中草藥料先用近似胃酸pH值的酸水煎煮提取,再用近似腸道消化液pH值的堿水煎煮提取后制成相應(yīng)制劑的方法。該法提取率高,用時短,成本低。但由于沿襲傳統(tǒng)高溫煎煮的操作,有效成分易破壞。謝志美采用半仿生法浸提水蒸餾和超聲破碎水蒸餾分別對艾葉揮發(fā)油進(jìn)行提取,均獲得直接蒸餾所無法提取的組分,但對于低揮發(fā)性成分,半仿生提取法更為適用。
目前中草藥提取方法趨于方便、高效、快捷,每種方法都有優(yōu)勢和劣勢。因此,應(yīng)該綜合考慮各提取方法的優(yōu)缺點(diǎn),結(jié)合實(shí)際情況選擇提取方法。提取后的中草藥可以根據(jù)需要選擇合適的分離純化方法進(jìn)一步提純精制以獲得更為高效,更有針對作用的藥物。