文 | 圖 廣州海維 李潛洲、韓金鋼、吳富華
羅非魚病害中最為棘手的就是鏈球菌病，該病死亡率高。急性型死亡速度快，治療起來極其困難；慢性型可持續(xù)數(shù)周，需反復(fù)治療，天氣或池塘環(huán)境條件發(fā)生變化時可能會再次出現(xiàn)死亡。因此，鏈球菌病已成為羅非魚養(yǎng)殖過程中的“惡魔”。
一、病原病因
1、病原
致病菌為鏈球菌，革染氏陽性球菌，近年來我國羅非魚鏈球菌病的主要致病菌為無乳鏈球菌。羅非魚鏈球菌病急性型病例以神經(jīng)癥狀為主，病魚以C形或逗號彎曲做旋轉(zhuǎn)運(yùn)動；慢性型病例以眼球突出、混濁為特征。
2、病因
鏈球菌為典型的條件致病菌，平時生存于養(yǎng)殖水體及底泥中，在富營養(yǎng)化的水域中能長期生存。當(dāng)水溫和池塘環(huán)境發(fā)生變化時，魚體抵抗力降低，養(yǎng)殖密度大、換水率低、餌料鮮度差及投喂量大的池塘易感染鏈球菌。
高溫和池塘環(huán)境惡化是誘發(fā)羅非魚鏈球菌病的兩大核心因素：高溫期間養(yǎng)殖階段進(jìn)入中后期，養(yǎng)殖養(yǎng)殖密度增大，投喂量逐漸增加，糞便、飼料殘餌在池底不斷積累，這些外來輸入者超過水體本身的自凈能力，底質(zhì)和水質(zhì)惡化的問題越來越明顯，底部“氧債”增加，大量有毒有害物質(zhì)產(chǎn)生，池塘底部酸堿失衡，底部病原菌大量滋生造成池塘疾病爆發(fā)。因此，平衡好“病原、羅非魚體質(zhì)、池塘環(huán)境”三者之間的關(guān)系至關(guān)重要。
二、診斷依據(jù)
1、基本癥狀及初步診斷
①、游動異常：常見為離群獨(dú)自漫游于水面，嚴(yán)重的身體失去平衡，側(cè)游或在水里打轉(zhuǎn)再沉入水底，部分魚體微曲。
②、眼球突出，白濁，嚴(yán)重者充血發(fā)紅（見圖1、圖2）。
③、多處器官充血發(fā)紅：腦、眼球、鰓蓋內(nèi)側(cè)、胸鰭基部、肛門（見圖1、圖2）。
④、內(nèi)臟器官發(fā)生病變：肝膽腫大、膽汁外溢，空腸空胃、部分腸道有積水，肝臟充血、脾臟顏色加深（見圖1、圖2）。
圖1、疑似患鏈球菌病的羅非魚
圖2、疑似患鏈球菌病的羅非魚
2、進(jìn)一步診斷
常見快捷的方法為“組織印片法染色”，取病變器官（肝臟、脾臟、腎臟等）組織進(jìn)行吉姆薩染色（見圖3），在高倍鏡下可以看到細(xì)胞周圍有大量的球形菌體，即可診斷為疑似鏈球菌病。另外，條件比較好的養(yǎng)殖戶或機(jī)構(gòu)，可以取病變器官組織進(jìn)行病原的分離和純化，在培養(yǎng)基上可以形成白色小菌落（見圖4），革染氏染色后呈紫色，多數(shù)呈鏈狀排列（見圖5），即可診斷為疑似鏈球菌病，確診需應(yīng)用生物學(xué)上的方法。
圖3.肝臟印片法染色，可見細(xì)胞周圍有大量紫色的球形菌體，有的呈念珠狀
圖4.取患病魚的肝臟劃線培養(yǎng)后的白色小菌落
圖5.分離純化病原，革染氏染色后可見紫色念珠狀球菌
3、確診
將疑似鏈球菌提取其基因組，使用16sRNA種屬鑒定引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，回收目的基因送測序，測序結(jié)果在BLAST比對，進(jìn)行確診。
三、流行情況
6～9月份池塘水溫在30℃以上時，羅非魚鏈球菌病進(jìn)入高發(fā)期，田珂（2013）等研究發(fā)現(xiàn)，水溫在33℃時無乳鏈球菌對羅非魚感染率較高，死亡最集中。粵北地區(qū)規(guī)格在100g以上感染率較高，感染率為70～80%。今年年初投的苗，現(xiàn)死亡規(guī)格為0.6～0.9斤/尾；去年過冬羅非魚，現(xiàn)死亡規(guī)格為1.2～2.5斤/尾。羅非魚累計死亡率普遍在10～20%，局部區(qū)域（如今年高要區(qū)金渡鎮(zhèn)腰崗）累計死亡率高達(dá)36%（見表1）。
表1.高要區(qū)金渡鎮(zhèn)腰崗羅非魚死亡調(diào)查表
四、傳播途徑和死亡機(jī)理
傳播源為苗種自生攜帶鏈球菌、池塘底泥殘留鏈球菌、水質(zhì)污染等。因此，建議選擇良種品牌羅非魚苗，比如海大“百容羅非苗”，以減少傳播源。其傳播的方式以水平傳播為主，通常以魚的糞便、病魚的尸體、流通的水體、網(wǎng)具等途徑傳播，傳播非常迅速，在適當(dāng)?shù)臏囟认?，一周?nèi)可波及全塘。鏈球菌感染魚體后，通過體內(nèi)循環(huán)直接進(jìn)入細(xì)胞，產(chǎn)生侵襲性酶和外毒素，進(jìn)而破壞細(xì)胞，影響魚體的正常新陳代謝，最終導(dǎo)致死亡。
五、池塘管理及防治措施
1、投海大“百容羅非苗”，體質(zhì)好抗病強(qiáng)，羅非發(fā)病率要低20%，死亡率要低10%
據(jù)福建海大趙曉杰報道，海大百容羅非在高溫期發(fā)病之后死亡率在4.3%~14.6%之間，平均為9.4%；本地普通苗發(fā)病之后羅非死亡率在11.4%~46.7%之間，平均21.2%。從高溫期鏈球菌發(fā)病率和死亡率來看，相對于本地苗，海大百容羅非發(fā)病率要低20%，發(fā)病之后死亡率要低10%，體現(xiàn)出了明顯的抗病優(yōu)勢（見表2）。
表2.高溫期養(yǎng)殖戶鏈球菌病發(fā)情況（福建海大趙曉杰提供）
2、高溫期做好“多調(diào)水、勤改底、定期消毒、內(nèi)服保健”等預(yù)防工作
鏈球菌是條件致病菌，通過“多調(diào)水、勤改底、定期消毒”等預(yù)防工作來改善羅非魚生長的池塘環(huán)境，抑制鏈球菌的滋生，切斷鏈球菌的傳播途徑；另外，做好“內(nèi)服保健”工作來增強(qiáng)羅非魚的免疫力，降低感染鏈球菌的概率。
➤ 調(diào)水：【3101】或【爽水寶】
3101主要成為枯草芽孢桿菌，爽水寶主要成分為乳桿菌、釀酒酵母菌。兩種產(chǎn)品均具有較強(qiáng)的分解和轉(zhuǎn)化能力，除污去臭，有效降低氨態(tài)氮、亞硝酸鹽、硫化氫等有害物質(zhì)，最終建立藻相、菌相，通過有益菌和藻類的生態(tài)占位作用，抑制有害細(xì)菌滋生。
➤ 改底：【底倍健】或【底倍康】
底倍健采用高活性的氧化劑+高效的復(fù)配催化劑，能夠快速氧化底泥，并且顯著提升底部氧化還原電位。底倍康為顆粒型，能快速沉入池底，通過分解、礦化、離子交換等作用，快速改良底質(zhì)，分解糞便、飼料殘餌等有機(jī)富營養(yǎng)物，改善池底發(fā)黑、發(fā)臭現(xiàn)象。高溫期間，同時又是羅非魚養(yǎng)殖中后期，適合的水溫加上惡化的塘底，恰好給鏈球菌提供了適宜的生長條件，改底工作，一方面可以破壞病原菌賴以生長的溫床，防止有害病菌爆發(fā)；另一方面改善了塘底環(huán)境，降低有毒、有害物質(zhì)對魚類的影響。
➤ 消毒：【二氧化氯】
海聯(lián)科二氧化氯濃度≥8%，是廣譜消毒劑、安全高效、用量少、無須活化、直接拋灑、二分鐘內(nèi)速溶、直達(dá)塘底、釋放高濃ClO2完成對池塘的立體消毒，殺滅病原菌，同時可以去除無機(jī)和有機(jī)污染物Fe2+、S2-、NO2-、H2S、藻毒素、土臭素等，達(dá)到改善池塘環(huán)境的作用。
➤ 內(nèi)服保?。骸靖文c利健】
富含多種肝膽修復(fù)因子，長期定期使用，可保持肝膽和腸道系統(tǒng)健康。有效的預(yù)防白肝、花肝、綠肝等肝臟疾病的發(fā)生，增強(qiáng)羅非魚的體質(zhì)和免疫力。
3、發(fā)病期間“三步走”控制和殺滅病原，降低羅非死亡率
先進(jìn)步
加強(qiáng)池塘管理工作
適當(dāng)?shù)慕档屯段沽浚瑴p少羅非魚的肝膽負(fù)荷；鏈球菌是兼性厭氧型細(xì)菌，增加水體溶氧可以有效抑制鏈球菌滋生，同時患病羅非魚吸收水體氧氣的能力下降，水體缺氧時易加重死亡，因此建議發(fā)病期間全程開啟增氧機(jī)；另外，有條件的養(yǎng)殖戶可以適當(dāng)?shù)募由钏弧惭b底部增氧設(shè)備，讓羅非魚遠(yuǎn)離表層高水溫區(qū)域。
第二步
內(nèi)服“抗生素+保肝護(hù)膽類產(chǎn)品”進(jìn)行治療
因鏈球菌會感染腦部，常規(guī)抗菌藥難以突破血腦屏障，且感染后期魚幾乎不吃料，解剖病魚時多發(fā)現(xiàn)空腸空胃，鏈球菌病發(fā)生早期用藥才有效。因此養(yǎng)殖戶平時要多巡塘，早發(fā)現(xiàn)早治療，確保更多初感染鏈球菌的魚和健康的魚都能通過吃料的方式內(nèi)服“抗生素+保肝護(hù)膽類產(chǎn)品”，達(dá)到治療的效果。通過內(nèi)服一方面可以殺滅魚體內(nèi)病原菌和增強(qiáng)肝膽功能，另一方面可以修復(fù)和增強(qiáng)魚體的免疫力。條件比較好的養(yǎng)殖戶或機(jī)構(gòu)，可以分離和純化病原菌，做“藥敏實驗”刷選有效的藥物，進(jìn)行針對性治療。
抗生素可選擇四環(huán)素類的多西環(huán)素，或酰胺醇類的氟苯尼考，或喹諾酮類的恩諾沙星，切記勿濫用抗生素，同時也要注意休藥期。保肝護(hù)膽類產(chǎn)品可使用“【海聯(lián)科3505】+【蚌毒靈散】”。海聯(lián)科3505添加了天然植物提取物及功能蛋白活性物質(zhì)，有別與傳統(tǒng)的維生素類產(chǎn)品，增強(qiáng)肝細(xì)胞活性，降低肝膽負(fù)荷；同時作用與魚類免疫器官，提高免疫力。蚌毒靈散具有清熱、涼血、解毒功效，另外對魚體組織致病菌有強(qiáng)大的抑菌、滅菌作用。
第三步
全塘用海聯(lián)科二氧化氯消毒，切斷傳播途徑
用二氧化氯消毒，殺滅水體中的病原菌，切斷傳播途徑，防止病原菌感染健康的魚。
總結(jié)
從近幾年的報道來看，粵北地區(qū)羅非魚鏈球菌病病情愈發(fā)嚴(yán)重，這與當(dāng)?shù)氐酿B(yǎng)殖模式（立體養(yǎng)殖模式為主）、池塘底質(zhì)差、水質(zhì)污染嚴(yán)重、放養(yǎng)密度大、投喂量不合理等問題息息相關(guān)。因此，高溫期間養(yǎng)殖戶一方面要科學(xué)管理池塘“多調(diào)水、勤改底、定期消毒、內(nèi)服保健”，做好預(yù)防工作；另一方面，羅非發(fā)病時要采用正確的治療方法，切勿病時亂投醫(yī)，加重病情，遵循“預(yù)防為主，防治結(jié)合”的原則。
綜上所述，從“選好苗種、增強(qiáng)羅非魚體質(zhì)、改善池塘環(huán)境”三方面著手，才能有效地降低羅非魚鏈球菌病的感染率和死亡率。
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