劉 輝,裴艷輝,馮義芝
(黑龍江省大慶市紅崗區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所,黑龍江大慶163000)
作者簡介:劉輝(1983 -),男,本科,獸醫(yī)師。
1 病原特點
仔豬紅痢又稱出血性腸炎,也叫梭菌性腸炎,或稱傳染性壞死性腸炎、仔豬腸毒血癥。仔豬紅痢的病原是C型產(chǎn)氣莢膜梭菌,該菌在自然界中散布很廣,土壤污水、糞肥、人糞和動物腸內(nèi)容物等多有該菌存在。在一旦感染了該病的豬群中,該菌常存在于一部分母豬的腸道中,也存在于豬舍的泥土和墊草中。因為該菌產(chǎn)生芽孢,所以在土壤中能生活多年。在發(fā)病的仔豬腸內(nèi)容物中,幾乎都可分離出該菌,臟器中則不一定,在病死仔豬中有的可分離出該菌,而另外一些則分離不出來。
2 形態(tài)和培養(yǎng)特性
C型產(chǎn)氣莢膜梭菌是菌形較大的梭菌,一般長2~4um,寬0.8~1.5um,革蘭氏染色陽性,陳舊的培養(yǎng)物,往往染成陰性,菌段較齊,單個或兩個在一起,有的兩個呈直角形,有時呈短鏈狀,無鞭毛,不運動,有莢膜,產(chǎn)生中心或偏端的橢圓形芽孢,但在人工培養(yǎng)基則不容易形成。
產(chǎn)氣莢膜梭菌是專性厭氣菌,但在這一類細(xì)菌中,產(chǎn)氣莢膜梭菌對厭氧條件的要求卻是最不嚴(yán)格的。在人工培養(yǎng)時,于厭氣肉肝湯中生長迅速,如接種的種子新鮮適量,則經(jīng)37℃培養(yǎng)3~4h,即已生長旺盛并產(chǎn)生大量氣體。在普通肉湯中亦可生長,但用瓊脂培養(yǎng)基在好氣條件下培養(yǎng)時,不能在培養(yǎng)基表面上生長。
用血液平板在厭氣條件下培養(yǎng)24h,形成直徑1~3mm的灰白色半透明,表面光滑而邊緣整齊的半凸起圓形菌落。菌落的周圍,環(huán)繞一圈透明的B溶血環(huán),其外面圍著一圈較寬的不完全溶血區(qū)。培養(yǎng)時間再長時,菌落直徑增大,中心隆起,邊緣扁平.有時厚度比較一致,只是邊緣處稍薄一些,并可看到有放射狀的紋路從菌落中心放出。在葡萄糖瓊脂表面經(jīng)厭氣培養(yǎng)生長的菌落,在25℃以上的溫度與空氣接觸后變成綠色,只是該菌的一個特征。
用瓊脂震蕩深層培養(yǎng)時,在培養(yǎng)基中形成雙凸透鏡狀菌落,但培養(yǎng)基中含葡萄糖時,由于細(xì)菌繁殖時產(chǎn)生大量氣體,把培養(yǎng)基漲裂成片斷,以致很難看清楚菌落的形狀。
該菌發(fā)酵葡萄糖、半乳糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、果糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。不發(fā)酵水楊素、衛(wèi)矛醇、甘露醇、鼠李糖,對葡萄糖和甘油不定。液化明膠,不消化肉片,凝固血清和蛋白,不產(chǎn)生靛基質(zhì),M.R.和V.P.陰性,產(chǎn)生硫化氫,牛乳呈暴性發(fā)酵。
3 抵抗力
產(chǎn)氣莢膜梭菌形成芽孢,因此其抵抗力比較強。一般由仔豬分離的菌種均能耐受80℃15~30min,100℃則幾分鐘即可死亡。在培養(yǎng)基中培養(yǎng)時,由于產(chǎn)酸細(xì)菌在含有被該菌發(fā)酵的糖類培養(yǎng)基中,只能生存1個月左右,或者更短一些時間,而在無糖培養(yǎng)基中則可生存幾個月,因此如用培養(yǎng)基傳代保存,則用無糖厭氣肉肝湯或多蛋白胨牛心湯固體培養(yǎng)基較為適宜。長期保存則以冷凍干燥保存為宜,用這種方法保存的菌種,至少十年其生化特性、毒力和抗原性不發(fā)生變化,其生命力則保持得更長。
4 毒素
該菌產(chǎn)生致死性外毒素。產(chǎn)生毒素的強弱與培養(yǎng)基的關(guān)系很大,于現(xiàn)在通用的培養(yǎng)基中,以肉肝胃酶消化湯最適合于產(chǎn)生毒素,因此用這種培養(yǎng)基培養(yǎng)產(chǎn)氣莢膜梭菌可以產(chǎn)生很強的毒素,厭氣肉肝湯則較差。如增加厭氣肉肝湯中的肝塊數(shù)量,雖可提高毒素的產(chǎn)生,但也增加培養(yǎng)基的費用,故大多采用肉肝胃酶消化湯。培養(yǎng)基的pH值,也影響毒素的產(chǎn)生,一般在培養(yǎng)基滅菌前修正pH值7.6~7.8為好。最適合于產(chǎn)生毒素的培養(yǎng)溫度為33~35℃,培養(yǎng)lOh毒素以達(dá)到較高峰,36h后開始下降。
引起仔豬紅痢的C型產(chǎn)氣莢膜梭菌所產(chǎn)生的主要致死毒素是a和B毒素,但在次要毒素上不產(chǎn)生o毒素,少數(shù)毒株產(chǎn)生u毒素,這是與引起羊猝狙的C型產(chǎn)氣莢膜梭菌不同之處。該菌培養(yǎng)濾液靜脈注射0. 025~0.OOlmL可致死小鼠,0.025—0. 05mL能致死家兔,0.2mL致死3日齡仔豬。
C型產(chǎn)氣莢膜梭菌出來引起仔豬紅痢外,還是羊猝狙和犢牛毒血癥的病原,試驗動物中家兔、豚鼠和小鼠對該菌都很易感,肌肉注射該菌培養(yǎng)物均可導(dǎo)致死亡,靜脈注射該菌毒素時,死亡更為迅速。